Validación del método para la cuantificación de Ciclosporina A en sangre total por HPLC/DAD

Abstract

El presente estudio describe la validación
del método para la cuantificación de
Ciclosporina A en sangre total por Cromatografía
Líquida de Alta Resolución (HPLC)
en Fase Reversa con Detector de Arreglo de
Diodos.
La Ciclosporina A es un fármaco inmunosupresor
con un estrecho margen terapéutico
además de su amplia variabilidad
en los procesos farmacocinéticos, justifican
su monitorización de dosis a pacientes con
trasplantes de órganos para evitar los efectos
secundarios y el posible rechazo del órgano
trasplantado.
La separación de la Ciclosporina A de
una matriz compleja como la sangre fue
llevada a cabo de manera exitosa utilizando
como fase estacionaria una columna C8
5um (250 mm x 4,6mm) o equivalente a L7

según la USP 37, la fase móvil fue una mezcla
de acetonitrilo y agua en gradiente, flujo
1.4 ml/min, temperatura de la columna 75ºC
y detección con Arreglo de Diodos a 210nm.
El método fue validado con los siguientes
parámetros: especificidad, linealidad,
precisión, exactitud, límite de detección y
límite de cuantificación. También se realizó
la prueba de aptitud del sistema. El método
fue específico para la Ciclosporina A, la respuesta
fue lineal en el rango de 100 a 1000
ng/mL de concentración del analito. El valor
del coeficiente de variación o desviación estándar
relativa (C.V. o DSR) para la precisión
fue óptimo. La recuperación media fue de
103,06%. Y el límite de detección y cuantificación
resultaron óptimos para la cuantificación
de Ciclosporina en sangre total en el
rango definido.
Finalmente el método cromatográfico
nos permitió separar y cuantificar a la Ciclosporina
A presente en las muestras de
sangre de pacientes con transplante renal.