Estandarización y validacion de pruebas de elisa tipo indirecto para la determinación de los niveles de anticuerpos IgG e IgE antileishmania, como método complementario para el diagnóstico y seguimiento de la respuesta al tratamiento

Abstract

La leishmaniasis cutánea se caracteriza
por la inducción de una respuesta inmune
celular y humoral, siendo los niveles de anticuerpos
IgG e IgE indicadores serológicos
del diagnóstico, la progresión y resolución de
la enfermedad. En el presente estudio se estandarizaron
dos pruebas de ELISA indirecto
para determinar los niveles séricos de anticuerpos
IgG o IgE contra antígeno soluble
de Leishmania braziliensis (ASL). Se trabajo a
partir de la cepa de L. braziliensis (MHOM/
BR/75/M2903). En el ELISA IgE se hizo un pretratamiento
del suero con anticuerpos anti-
IgG humano y Polietilenglicol (PEG); la dilución
óptima de la muestra para ambos ELISA
fue 1/21, la dilución del conjugado fue 1/500
para el ELISA IgG y 1/100 para el IgE.
Para el ELISA IgG estandarizado se encontró
un índice de correlación de Kappa
de 1 (p<0,05), frente al ELISA comercial rBiopharm®. Con una sensibilidad del 100%;
100% de especificidad, 100% valor predictivo
positivo y 100% valor predictivo negativo.
Sin embargo ambos test de ELISA
presentaron reacciones cruzadas con anticuerpos
anti-Trypanosoma. La validez de los
resultados demuestran que los ELISAs estandarizados
pueden ser utilizados como
herramienta de diagnóstico y seguimiento