Amplificación isotérmica mediada por LOOP (LAMP) de ácidos nuclecios en el diagnostico clínico

Resumen

A medida que va desarrollando la tecnología,
los microorganismos también van
aumentando su capacidad de virulencia
haciéndose más resistentes a los antibióticos
de última generación; pruebas de rutina
como la Reacción en Cadena de la Polimerasa
(PCR) son herramientas que nos
ayudan en el diagnóstico clínico, pero una
de las principales desventajas es su alto
costo debido al equipamiento que usa y
su la larga duración en que esta puede entregar
resultados. Para ello es recomendable
usar métodos rápidos, sensibles y específicos
que nos ayuden en el diagnóstico
de enfermedades infecciosas. Un novedoso
método que actualmente se usa en países
desarrollados es la Amplificación Isotérmica
Mediada por Loop (LAMP) de Ácidos
Nucleicos. LAMP brinda resultados en

menor tiempo con alta sensibilidad y especificidad,
necesitando así de un baño maria
que funciona a una sola temperatura entre
60°C a 65°C, 4 cebadores como mínimo y 6
como máximo todos ellos altamente especializados,
la DNA polimerasa es la Bst polimerasa
la cual tiene actividad desplazante
de cadena que proviene de Bacillus stearothermofilus;
en caso de amplificar RNA se
hace uso de una transcriptasa reversa; los
resultados pueden ser vistos a simple vista
debido a la turbidez que forma después de
la reacción, también se pueden usar reactivos
como la calceina (método visual por
fluorescencia), CYBR green, que dan cierta
coloración cuando la reacción se torna positiva.
Los países que están en vías de desarrollo
son los que más sufren de infecciones
por microorganismos, una de las causas
se da por la pobreza y mala alimentación
siendo así LAMP una buena opción para incorporar
como pruebas de rutina en el laboratorio
debido a su bajo costo y a su simplicidad
en cuanto a equipos.