https://doi.org/10.53287/roct1421ti19p
REVISTA CON-CIENCIA Nº2/VOL. 9, NOVIEMBRE 2021, ISSN: 2310-0265
Estudio de los parámetros de calidad de la especie vegetal Urtica
urens L. recolectada en la provincia Ingavi del Departamento de La Paz
Study of the quality parameters of Urtica urens L. collected in the Ingavi province of the Depart- ment of La Paz
GUTIÉRREZ DURÁN, MARÍA DEL PILAR1* GONZÁLES DÁVALOS, EDUARDO LUCIO1
FECHA DE RECEPCIÓN: 16 AGOSTO 2021 FECHA DE ACEPTACIÓN: 5 NOVIEMBRE 2021
Resumen
Introducción: El incremento en el consumo de recursos naturales para el alivio de diferentes enfermedades ha llevado a varios países a diseñar mecanismos de control, que garanticen mediante métodos físico-químicos la calidad del material vegetal que se utilizará como materia prima para las preparaciones farmacéuticas y/o como medi- cina tradicional. La falsificación, la mala calidad o la adulteración en estos productos constituyen una grave amenaza a la seguridad del consumidor.
El estudio de los parámetros de calidad de una especie vegetal nos permite reconocer su identidad, su pureza, así como el contenido de principios activos, que garanticen su calidad, eficacia y seguridad. U. urens L. (Urticáceas) es una especie ampliamente distribuida en Amé-
Introduction: The increase in the consump- tion of natural resources for the relief of diffe- rent diseases has led several countries to design control mechanisms that guarantee through physical-chemical methods the quality of the plant material that will be used as raw material for pharmaceutical preparations and / or as tra- ditional medicine. Counterfeiting, poor quality, or adulteration in these products pose a serious threat to consumer safety. The study of the quality parameters of a plant species allows us to recog- nize its identity, its purity, as well as the content of active principles, which guarantee its quali- ty, efficacy and safety. U. urens L. (Urticaceae) is a widely distributed species in South America, in Bolivia it is found in different types of terrain,
1 AREA DE FARMACOLOGÍA, INSTITUTO DE INVESTIGACIONES FÁRMACO BIOQUÍMICAS “LUIS ENRIQUE TERRAZAS SILES”, FACUL TAD DE CIENCIAS FAR MACÉUTICAS Y BIOQUÍMICAS, UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRÉS, LA PAZ, BOLIVIA.
* AUTOR PARA CORRESPONDENCIA: PILARGDD@GMAIL.COM HTTPS://ORCID.ORG/0000-0001-7287-2586 HTTPS://ORCID.ORG/0000-0002-4714-2503
rica del Sur, en Bolivia se encuentra en diferen- tes tipos de terreno, en el Cantón Chama de la provincia Ingavi es ampliamente utilizada por sus pobladores principalmente en el tratamien- to de enfermedades inflamatorias e urinarias.
Objetivo: Estudiar los parámetros de ca- lidad de la especie vegetal U. urens L. re- colectada en el Cantón Chama de la pro- vincia Ingavi del Departamento de La Paz.
Materiales y métodos: Se realizó el análi- sis de las características organolépticas, para el análisis micrográfico se utilizó el material vege- tal seco reducido a polvo, el análisis físico quí- mico se realizó por métodos oficiales AOAC. Se obtuvieron cuatro tipos de extractos, extracto etéreo, diclorometánico, etanólico y acuoso, en ellos se determinó la composición cualitativa de grupos mayoritarios de moléculas median- te la técnica Screening Fitoquímico y se elabo- ró el perfil cromatográfico de la especie vegetal.
Resultados: El estudio reveló la presencia de pelos urticantes unicelulares y pluricelulares, los parámetros fisicoquímicos concuerdan con los va- lores referencia encontrados en las principales far- macopeas. El screening fitoquímico cualitativo re- veló la presencia mayoritaria de taninos, alcaloides, compuestos reductores, esteroles, flavonoides y cu- marinas. Adicionalmente, el perfil cromatográfico reveló la presencia de diferentes manchas en fases móviles asociadas principalmente con flavonoides.
Conclusiones: El estudio de los paráme- tros de calidad de Urtica urens L aporta con información para su identificación y estable- ce la presencia de determinados compuestos que serían los responsables de la actividad far- macológica atribuida por su uso tradicional.
PALABRAS CLAVE
Urtica, Farmacognosia, Parámetros De Calidad
in the Canton Chama of the Ingavi province it is widely used by its inhabitants mainly in the treatment of inflammatory and urinary diseases.
Objective. To study the quality para- meters of the plant species U. urens L. co- llected in the Canton Chama of the Inga- vi province of the Department of La Paz.
Materials and methods: The analysis of the organoleptic characteristics was carried out, for the micrographic analysis the dry plant ma- terial reduced to powder was used, the physi- cal-chemical analysis was carried out by official AOAC methods. Four types of extracts were obtained, ethereal, dichloromethane, etha- nolic and aqueous extract, in which the quali- tative composition of major groups of mole- cules was determined by the phytochemical screening technique and the chromatographic profile of the plant species was elaborated.
Results: The study revealed the presence of unicellular and multicellular stinging hairs, the physicochemical parameters agree with the refe- rence values found in the main pharmacopoeias. The qualitative phytochemical screening revea- led the majority presence of tannins, alkaloids, reducing compounds, sterols, flavonoids and coumarins. Additionally, the chromatographic profile revealed the presence of different spots in mobile phases mainly associated with flavonoids.
Conclusions: The study of the quali- ty parameters of Urtica urens L provides in- formation for its identification and establi- shes the presence of certain compounds that would be responsible for the pharmacolo- gical activity attributed to its traditional use.
KEYWORDS
Urtica, Pharmacognosy, Quality Parameters
U. urens L. es una planta anual, crece de 10-50 cm de alto (Burkart, 1987), es una planta vivaz, sin látex con tallos estriados suculentos provistos de pelos urticantes delgados esparcidos en ambas caras. La acción urticante se debe
al líquido contenido en los pelos que se libera al romperlos. (Bruneton, 1999; Torrico, 1994; Zalles y De Lucca, 1991).
La característica más relevante de las ortigas es poseer pelos urticantes, según varios estudios (Wagner y col., 1994; Collier y col., 1956; Emmelin y col., 1949) estos pelos contienen en su composición histamina, ácido fórmi- co, acetilcolina, ácido acético, ácido butírico, leucotrienos, 5- hidroxitrip- tamina. Se han aislado de diferentes especies de urticas y por diferentes métodos varios compuestos, entre ellos los glicósidos (Feng y col., 2011), lignanos (Yan y col., 2008; Zhou y col., 2009), polisacáridos (Li y col., 2009), flavonoides como la isovitexina, isoquercitrina, astragalina, afzelin y querci- trina, también se conoce que en U. dioica conocida como urtica mayor se identifico el flavonoide 5,2´,4´-trihidroxi-6,7,8,5`-tetrametoxiflavona, ácido clorogénico y 2-O-cafeoilmalico, β-sitosterol (Aishan y col., 2010; Chatur- vedi, 2001; Pinelli y col. 2008, Berges y col., 1995).
En el aceite esencial de U. dioica se identificaron 43 compuestos que re- presentan el 95.8% del aceite, entre los principales componentes de este aceite se encontraron el carvacrol, carvona, naftaleno, E-anetol, hexahidro- farnesil acetona, E-geranil, β-ionona y fitol (Süleyman y col., 2012). La com- posición de una fracción lipofílica de U. urens L. estudiada por Lapinskaya y Kopyt´ko (2008) reporto la presencia de vainillina, ácido palmítico, ácido li- noléico, ácido linolénico, escualeno, β-sitosterol, β-tocoferol, y ester etilico del ácido palmítico. Otros constituyentes presentes en esta especie vegetal son el ácido 13-hidroxioctadecanotrieno, la escopoletina, sitosterol y su glu- cósido, además de una proporción elevada de clorofilas A y B.
La comercialización de Urtica urens L. cada vez mas alta, y tiene un amplio consumo como planta seca y/o deshidratada, en combinaciones de diferen- tes partes de la misma planta o en combinaciones con diferentes especies vegetales.
La identificación mediante métodos fisicoquímicos, recolección, deseca- ción y almacenamiento de esta especie vegetal se convierte en un problema a la hora de caracterizar la droga, detectar adulteraciones, como la sustitu- ción y/o falsificación, reconocer si la muestra es diferente a la descrita, si la recolección y almacenamiento fueron correctos, además determinar el grado de contaminación. Resulta entonces un requisito indispensable contar con la determinación de los parámetros de calidad de Urtica urens L. que permita potenciar el uso de la materia prima de la especie para realizar in- vestigaciones hacia preparaciones farmacéuticas, formulaciones magistrales.
Material vegetal.
La especie vegetal U. urens L. fue recolectada en el Departamento de La Paz, Provincia Ingavi, sexta sección Jesús de Machaca, Cantón Chama a 110 km de la ciudad de La Paz ubicada a 68º 50´00´´ longitud Oeste, 16º45´00´´ latitud Sur. La autentificación de U. urens L. (Voucher Nº1) se realizó en el Herbario Nacional de Bolivia (LPB) a cargo del botánico Javier Quisbert.
Análisis de las características organolépticas
Se analizó olor, color, sabor, condición y textura en la droga pulverizada.
Análisis micrográfico
Se utilizó la muestra reducida a polvo y se la examinó en el microscopio, utilizando agua e hidrato cloral como aclarantes, y fluoroglucina clorhídrica para la coloración de tejido lignificado (coloración rosa).
Determinación del contenido de humedad
Se realizó por el método directo, en una balanza de humedad (AND- MX50) con 1g del material vegetal pulverizado.
Determinación de cenizas totales
Se carbonizó 2g de material vegetal, luego se incineró la muestra por dos horas en un horno mufla a 550ºC (Wise Therm FHP-03).
Determinación de cenizas ácidas
A las cenizas totales obtenidas en la anterior determinación, se añadieron 2-3 ml de ácido clorhídrico al 10%, se calentó en un baño de agua hirviendo por 10 min, la solución se filtró, se añadió solución de nitrato de plata, para precipitar cloruros, el papel filtro se secó a 105ºC y se transfirió al crisol ori- ginal, se procedió de la misma manera que para la determinación de cenizas totales.
Determinación de cenizas solubles en agua
Se tomaron las cenizas totales obtenidas anteriormente y se le añadie- ron 15 a 20 ml de agua, esta solución se hizo hervir durante 5 minutos, y se procedió de la misma manera que para la determinación de cenizas totales.
Determinación de materia extraña
Se utilizaron muestras de 100g que esparcieron sobre un papel, se se- pararon las materias extrañas, se pesó la materia extraña y se determinó el porcentaje en base a la muestra utilizada.
Índice de hinchamiento
Se llevó 1g de muestra a una probeta, se humedeció la muestra con alco- hol, y se añadió 25 ml de agua destilada y se agito cada 10 minutos durante una hora, se dejó en reposo por cuatro horas, finalmente se midió el volu- men ocupado por la muestra incluyendo el mucílago.
Preparación de los extractos: etéreo, diclorometánico, etanólico y acuoso
La obtención de los extractos orgánicos se realizó por percolación en frío mediante el procedimiento de polaridad creciente por extracción sucesiva con éter de petróleo, diclorometano y etanol. Se emplearon 300g de ma- terial vegetal seco y pulverizado, el total de los líquidos extractivos se con- centraron en un rotaevaporador (Heidolph Labarota 4000 digital) a presión reducida y temperatura controlada hasta la obtención de un extracto de consistencia pastosa que se dejó secar a temperatura ambiente, bajo pro- tección de la luz. Para la obtención de los extractos acuosos, se procedió a verter agua destilada sobre el recipiente que contiene la planta pulverizada libre del último solvente (etanol), se tapó y se mantuvo así por un periodo de dos horas, posteriormente se filtró y se sometió a un proceso de liofiliza- ción (Christ ALPHA2-4 LO plus).
Determinación de la composición cualitativa de grupos mayoritarios de moléculas en los extractos de Urtica urens L. mediante la técnica Screening Fitoquímico.
Para la determinación de grupos de compuestos presentes en los ex- tractos acuoso, etanólico, diclorometánico y etéreo se realizó un screening fitoquímico cualitativo (tabla 1), mediante reacciones colorimétricas y de precipitación en tubos de ensayo.
Perfil cromatográfico de los extractos
Una solución de la muestra se aplicó por medio de un tubo capilar sobre la placa cromatográfica, superficie del adsorbente inerte silicagel de 10 x 6cm x 2mm de espesor, 60 F254 (Merck) utilizando como eluyente la fase móvil tolueno:acetona (8:2), éter:acetona (9:1) en estas fases se separaron los ex- tractos etéreo y de diclorometano; fase móvil tolueno:cloroformo:acetona (40:25:35) se separaron los extractos de diclometano y etanol y en la fase móvil n-butanol:ácido acético glacial:agua (50:10:40) se desarrollaron los extractos etanólicos y acuosos; la placa se analizó utilizando luz ultravioleta a 254 y 365 nm.
Análisis micrográfico
La micrografía constituye una técnica sencilla que permite identificar una especie vegetal y su grado de pureza, mediante la comparación de su mor- fología con una muestra autentica. Esta técnica constituye una herramien- ta básica y valiosa cuando se trata de muestras pulverizadas de droga. El análisis micrográfico de Urtica urens se realizó comparando su morfología con otra reportada en un estudio anterior (Boelcke y Viznis, 1987), donde U. urens presenta numerosos tricomas o pelos como una de sus características más notables, estos pelos urticantes son pelos glandulares que en su ápice presentan una zona de fácil ruptura al contacto. La aclaración leve con hi- drato de cloral de una muestra de la planta recolectada evidenció (figura 1) la presencia de pelos urticantes unicelulares y pluricelulares, parénquima y vasos helicoidales
Análisis de las características organolépticas de las plantas recolectadas
Determinación del contenido de humedad
Determinación de cenizas totales
Determinación de cenizas ácidas
Determinación de cenizas solubles en agua
Determinación de elementos extraños
Determinación del índice de hinchamiento
Rendimiento de los procesos de extracción
Determinación de la composición cualitativa de grupos mayoritarios de
mo-léculas en los extractos de Urtica urens L. mediante la técnica screening fitoquímico.
Perfil cromatográfico de los extractos
Extracto etéreo
Extracto diclorometánico
Figura 3. Cromatografía en capa fina (CCF) del extracto diclrometánico de Urtica urens L.
Extracto etanólico
Extractos acuosos
Siguiendo la metodología establecida en la Real Farmacopea Española, para la especie Urtica urens L. se ha determinado la presencia de los elemen- tos celulares y no celulares que la caracterizan; los parámetros de calidad determinados fueron humedad 2,59%, cenizas totales 24,78% este valor se- gún la Agencia Europea del medicamento no debiera ser mayor al 8%, pero en esta especie se reporta que sus hojas son ricas en potasio y sílice, lo que puede explicar su alto contenido en cenizas totales; el contenido de cenizas ácidas es 2,23%; cenizas solubles en agua 6,34%, elementos extraños 0,5% e índice de hinchamiento 17ml. El screening fitoquímico realizado a los ex- tractos etéreo, diclorometánico, etanólico y acuoso de U. urens L. reveló una importante presencia de flavonoides, esteroles, taninos, alcaloides y com- puestos reductores en ambas especies vegetales, este screening realizado de manera preliminar nos permite aproximarnos a conocer la composición de esta especie que crece en la provincia Ingavi. Se elaboró el perfil cro- matográfico para los extractos etéreo, diclorometánico, etanólico y acuoso de U. urens. Los resultados obtenidos no son concluyentes ya que pueden cambiar según la época y lugar de recolección.
A la Cooperación Sueca (ASDI), a la Agencia Española de Cooperación Internacional y Desarrollo (AECID) D/031518/10, al financiamiento por re- cursos IDH.
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